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動(dòng)物行為實(shí)驗(yàn)專題:高架零迷宮(ZERO MAZE)

      高架零迷宮(EZM)是高架十字迷宮(EPM)的改良版本,結(jié)合了經(jīng)典和新的行為學(xué)測(cè)量方法。O迷宮作為一種焦慮行為的檢測(cè)方法,已經(jīng)越來(lái)越受歡迎。它利用了嚙齒動(dòng)物與生俱來(lái)的對(duì)黑暗封閉空間的偏好,而不是對(duì)開(kāi)放空間的偏好。與 EPM 不同的是,EZM 將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物置于一個(gè)連續(xù)的回路中,該回路具有交替的圍墻和非圍墻區(qū)域。

       迷宮是根據(jù)Montgomery (1955)實(shí)驗(yàn)的原理開(kāi)發(fā)的,該實(shí)驗(yàn)使用高架Y迷宮,其中一個(gè)選擇臂封閉以模擬**空間,另一個(gè)選擇臂未封閉。Shepherd 及其同事在 1994 年發(fā)表的論文中開(kāi)發(fā)了高架零迷宮 (Shepherd 1992, Shepherd et al., 1993 ) 并在藥理學(xué)上驗(yàn)證了小鼠的焦慮樣行為。作為高架十字迷宮的更好替代品,O迷宮引起了越來(lái)越多的興趣。

高架零迷宮由一條高出地面的圓形軌道組成,分為四個(gè)象限。小巷的交替部分(象限)被暗墻包圍,而其余部分保持開(kāi)放。EZM消除了EPM的選擇點(diǎn),從而消除了與中央?yún)^(qū)域相關(guān)的模糊性。

儀器設(shè)備

       零迷宮由直徑為 40 至 110 厘米、寬度為 50 至 10 厘米的圓形小巷組成。小巷分為四個(gè)相等的象限。每個(gè)相對(duì)的象限都用大約 30 厘米高的深色墻壁圍起來(lái),以創(chuàng)造一個(gè)封閉的空間。其余的兩個(gè)象限與大約 5 毫米的邊緣接壤,以防止受試者從軌道上掉下來(lái),這些象限用作開(kāi)放的焦慮空間。儀器被抬高到地板上方至少 70 厘米的高度。

      為避免陰影并確保所有象限的照明均等,應(yīng)從上方點(diǎn)亮 EZM。選擇適當(dāng)?shù)恼彰鬟€能確保動(dòng)物看到食物獎(jiǎng)勵(lì)或其他提示(如果使用)。安裝在迷宮上方的視頻跟蹤軟件,例如VisuTrack,可以幫助實(shí)時(shí)評(píng)分、跟蹤和記錄對(duì)象及其在迷宮內(nèi)的運(yùn)動(dòng)。在每次試驗(yàn)之前和之后必須徹底清潔設(shè)備,以限制來(lái)自先前試驗(yàn)的任何殘留刺激的影響。

訓(xùn)練方法


      高架零迷宮的連續(xù)小巷設(shè)計(jì)比高架十字迷宮更敏感,因此用于評(píng)估焦慮和焦慮樣行為更合理。與 EPM 一樣,EZM 也利用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)開(kāi)放空間的偏好作為評(píng)估zhi療組或ji病組與對(duì)照組相比的表現(xiàn)的一種方式。

      嚙齒動(dòng)物天生喜歡封閉或封閉的空間,這讓它們感到**。因此,他們傾向于避免探索暴露的小巷,就像探索封閉的小巷一樣。接受抗焦慮藥wu zhi療的動(dòng)物表現(xiàn)出減少的焦慮樣行為,更可能探索迷宮的暴露區(qū)域。另一方面,由于焦慮樣感覺(jué)增強(qiáng),接受抗焦慮藥wu zhi療的動(dòng)物傾向于在開(kāi)放空間花費(fèi)較少時(shí)間,而在探索封閉區(qū)域花費(fèi)較多時(shí)間。動(dòng)物在這兩個(gè)區(qū)域花費(fèi)的時(shí)間量提供了關(guān)于受試動(dòng)物焦慮狀態(tài)的信息。

迷宮本身不需要預(yù)訓(xùn)練,因?yàn)樵撊蝿?wù)旨在測(cè)試受試動(dòng)物對(duì)陌生迷宮的反應(yīng)。每次試驗(yàn)前,必須用乙醇溶液徹底清潔儀器,以避免殘留刺激的影響(如果有的話)。

零迷宮中焦慮樣行為的評(píng)估

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在測(cè)試前至少 1 小時(shí)被帶入測(cè)試區(qū)域。在測(cè)試期間,確保所有照明水平一致且不抑制探索行為是很重要的。

視頻記錄開(kāi)始(如果使用),測(cè)試動(dòng)物被放置在封閉小巷的中心,可以自由探索迷宮(也有部分文獻(xiàn)顯示將測(cè)試動(dòng)物放置在開(kāi)放區(qū)域的中心)。每次測(cè)試至少持續(xù)5分鐘,之后將測(cè)試動(dòng)物小心地從迷宮中取出并放入其鼠籠中。錄制也會(huì)在5分鐘結(jié)束時(shí)停止。對(duì)每只測(cè)試動(dòng)物重復(fù)試驗(yàn)約3天。

數(shù)據(jù)分析



與 Elevated Plus Maze 類似,在 Elevated Zero Maze 任務(wù)期間測(cè)量的變量包括:

  • 在開(kāi)放區(qū)域花費(fèi)的時(shí)間百分比

  • 在圍墻區(qū)域花費(fèi)的時(shí)間百分比

  • 進(jìn)入開(kāi)放空間的延遲(潛伏期)

  • 在開(kāi)放和封閉區(qū)域花費(fèi)的總時(shí)間

  • 總活動(dòng)距離


其他可觀察的措施包括:

  • 通過(guò)分析從封閉區(qū)域內(nèi)嗅探的頻率和持續(xù)時(shí)間來(lái)計(jì)算風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估行為。

  • 通過(guò)評(píng)估開(kāi)放區(qū)域邊緣的頭部下垂次數(shù)來(lái)降低焦慮水平。


優(yōu)勢(shì)與局限



       高架零迷宮的主要優(yōu)勢(shì)在于它在測(cè)試方法和解釋方面的簡(jiǎn)單性。EZM 克服了 EPM 由于其中央平臺(tái)而產(chǎn)生的測(cè)量模糊性。在 EPM 中反復(fù)試驗(yàn)后,受試者傾向于將中央平臺(tái)視為**空間。在 EPM 中分析嚙齒動(dòng)物行為時(shí),很難評(píng)估動(dòng)物在中央平臺(tái)上花費(fèi)的時(shí)間,無(wú)論是在進(jìn)入手臂之前還是在手臂進(jìn)入之間。EZM 消除了這個(gè)中心區(qū)域,并允許動(dòng)物通過(guò)在開(kāi)放區(qū)域和封閉區(qū)域之間移動(dòng)來(lái)不斷探索迷宮的不同象限(Shepherd 1994)。

與其他任務(wù)不同,重復(fù)暴露于高架零迷宮的測(cè)試動(dòng)物表現(xiàn)出焦慮增加,這表明受試者的情緒反應(yīng)隨著每次暴露于迷宮任務(wù)而改變。同樣重要的是要記住,EZM 會(huì)檢查與人類焦慮情緒相比的動(dòng)物情緒。然而,這個(gè)測(cè)試并不等同于人類焦慮的整個(gè)范圍。很明顯,抗焦慮藥wu可以減少迷宮中動(dòng)物的焦慮樣行為,但還有其他因素需要考慮,這些因素可能在解釋結(jié)果中發(fā)揮重要作用,例如動(dòng)物的年齡、體重、性別、物種和品系測(cè)試。

總結(jié)



1、高架零迷宮是根據(jù)蒙哥馬利 (1955) 調(diào)查原理開(kāi)發(fā)的高架 Plus 迷宮的改編版。

2、EZM 由 Shepherd (1992) 設(shè)計(jì)。

3、為了克服 EPM 中中央平臺(tái)產(chǎn)生的歧義,EZM 被設(shè)計(jì)為具有封閉和開(kāi)放空間的圓形小巷。

4、EZM 在評(píng)估焦慮樣行為時(shí)比 EPM 更敏感。

5、接受抗焦慮藥wu  zhi療的受試者通過(guò)更多地訪問(wèn)開(kāi)放區(qū)域,往往表現(xiàn)出減輕的焦慮樣行為。

6、用抗焦慮藥wu  zhi療的受試者表現(xiàn)出高度的焦慮樣行為,并且更喜歡迷宮的封閉區(qū)域。

7、特定品系的嚙齒動(dòng)物可能在迷宮中表現(xiàn)不同。

8、對(duì) EZM 的反復(fù)試驗(yàn)往往會(huì)增加類似焦慮的行為。


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