在神經科學和心理學研究中，小鼠的社交行為是探索自閉癥、精神分裂癥、焦慮癥等病疾機制的重要切入點。三箱社交實驗（Three-Chamber Social Test）作為經典的行為學范式，通過模擬小鼠對“陌生個體”與“非生命物體”的選擇偏好，定量評估其社交能力與社交新穎性認知。以下系統(tǒng)地解析該實驗的設計原理、操作流程及關鍵注意事項，為科研工作者和愛好者提供實用指南。

一、應用領域：從病疾模型到藥wu篩選

三箱社交實驗廣泛應用于以下研究方向： 

1. 自閉癥譜系障礙（ASD）研究 

通過敲除SHANK3、NLGN3等基因構建自閉癥模型小鼠，檢測其社交互動缺陷。 

2. 精神分裂癥機制探索 

評估NMDA受體拮抗劑誘導的社交退縮行為。 

3. 抗焦慮/抑郁藥wu開發(fā) 

分析藥wu干預后小鼠對陌生同類的探究意愿變化。 

4. 社交記憶研究 

引入“熟悉鼠”與“陌生鼠”對比，測試小鼠的社交新穎性識別能力。 

5. 環(huán)境因素影響評估 

如孕期壓力、重金屬暴露等對子代社交行為的影響。

二、實驗原理：行為選擇的量化邏輯 

實驗基于小鼠的天然行為特征： 

- 探索本能：小鼠傾向于探索新環(huán)境或新個體； 

- 社交偏好：正常小鼠會選擇與同類互動而非無生命物體； 

- 新穎性驅動：當存在熟悉與陌生個體時，更偏好后者。 

實驗裝置由三個透明亞克力箱（20×40×22cm）組成，中間箱與兩側箱通過可移動隔板連通。一側放置陌生小鼠（Strange Mouse, S1），另一側放置物體（Object, O）或第2只陌生鼠（S2）。通過記錄小鼠在各區(qū)域的停留時間、接觸次數(shù)等參數(shù)，計算其社交指數(shù)（Social Index）： 

三、實驗流程：標準化操作步驟

#1. 實驗準備 

- 動物適應性飼養(yǎng)：實驗前7天將小鼠置于12h/12h光暗循環(huán)環(huán)境，所有測試在暗周期（活躍期）進行。 

- 陌生鼠選擇：使用同品系、同性別的年齡匹配小鼠（避免攻擊行為），提前隔離飼養(yǎng)24小時。 

- 裝置設置： 

- 三箱清潔：依次用肥皂水、70%乙醇擦拭，消除氣味殘留。 

- 物體選擇：固定塑料圓柱或金屬網格籠（直徑10cm）。 

- 環(huán)境控制：維持光照強度20-30勒克斯，背景噪音<50分貝。

#2. 實驗階段 

階段一：自由探索（10分鐘） 

移除兩側隔板，讓受試小鼠在三箱內自由活動，適應環(huán)境。 

階段二：社交偏好測試（10分鐘） 

- 一側箱放入陌生鼠（S1，置于金屬籠內防止接觸），另一側放入物體（O）。 

- 記錄小鼠在S1區(qū)、O區(qū)的停留時間及鼻觸次數(shù)。 

階段三：社交新穎性測試（10分鐘） 

- 將物體（O）替換為第2只陌生鼠（S2），檢測小鼠對“熟悉（S1）”與“新穎（S2）”的選擇偏好。 

#3. 數(shù)據(jù)采集與分析 

- 關鍵參數(shù)： 

- 各區(qū)停留時間占比 

- 主動接觸次數(shù)（鼻觸、跟隨） 

- 自我理毛次數(shù)（焦慮指標） 

- 分析軟件：EthoVision、Visutrack等自動追蹤系統(tǒng)，或人工盲法視頻分析。

四、注意事項：規(guī)避誤差的關鍵點

#1. 環(huán)境控制 

- 氣味干擾：每只小鼠測試后徹底清潔裝置，建議使用含1%醋酸溶液去除尿漬信息素。 

- 光照均一性：避免單側強光導致位置偏好。 

- 溫濕度穩(wěn)定：維持23±1℃，濕度50±10%。

#2. 動物狀態(tài)管理 

- 避免應激：抓取小鼠時使用隧道法，測試前30分鐘將動物靜置在實驗間。 

- 品系差異：C57BL/6小鼠社交活躍，而BALB/c品系天性孤僻，需設置合理基線。 

- 年齡限制：優(yōu)選8-12周齡小鼠，老年鼠（>18月）可能出現(xiàn)自然社交衰退。 

#3. 實驗設計優(yōu)化 

- 陌生鼠輪換：同一只陌生鼠zui多參與3次測試，防止“過度熟悉化”。 

- 性別匹配：雌性小鼠發(fā)情周期可能影響社交意愿，建議記錄動情周期階段。 

- 時長調整：對高焦慮品系（如BTBR），可縮短測試至5分鐘/階段。 

#4. 數(shù)據(jù)分析陷阱 

- 排除標準：總活動距離<500cm的數(shù)據(jù)視為無效（可能因病疾或環(huán)境不適）。 

- 多參數(shù)交叉驗證：結合接觸次數(shù)與停留時間綜合判斷，避免單一指標偏差。 

- 批次效應控制：同一實驗的所有測試需在連續(xù)3天內完成，減少環(huán)境波動影響。 

五、技術延伸：從傳統(tǒng)到智能 

隨著技術進步，三箱實驗正與新型工具結合： 

- 無線神經記錄：同步檢測前額葉皮層神經元活動，關聯(lián)社交行為與神經編碼。 

- 深度學習算法：通過Visutrack實現(xiàn)接觸行為的自動識別，準確率>95%。 

- 多模態(tài)刺激：加入氣味擴散裝置，研究嗅覺在社交決策中的作用。 

三箱社交實驗以其簡潔的設計和豐富的可拓展性，成為解析社交行為神經機制的利器。研究者需牢記：標準化操作是數(shù)據(jù)可靠性的基石，而多維度的參數(shù)分析則能深度揭示行為背后的生物學意義。未來，該范式與基因編輯、光遺傳等技術的融合，必將為精神病疾研究與療治開辟新路徑。 

動物行為分析軟件：

VisuTrack軟件

SuperMaze軟件

FishTrack斑馬魚分析軟件

動物行為儀器：

自身給藥、條件恐懼、斯金納、震驚反射（PPI）、跑步機、各類經典迷宮等

動物抓撓分析儀、動物震顫行為分析儀、動物捕食行為分析儀

動物主動步態(tài)分析、動物被動步態(tài)分析、動物自由步態(tài)分析（內測中）

睡眠剝奪儀、體溫維持儀、智能熱板儀、轉棒疲勞儀、鼠尾光照測痛儀等

神經電生理：

光遺傳、無線光遺傳

光纖記錄系統(tǒng)（單通道、多通道）

電生理信號采集系統(tǒng)（腦電、肌電等）

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